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玫瑰愈傷組織的誘導(dǎo)培養(yǎng)

愈傷組織的誘導(dǎo)Hill(1967)Zui早報(bào)道從雜交茶香月季(hybridtearose)的莖上誘導(dǎo)了愈傷組織,該實(shí)驗(yàn)證明在培養(yǎng)基中添加2,4-D或添加NAA和激動(dòng)素KT均能很快誘導(dǎo)出愈傷組織。隨后不同實(shí)驗(yàn)以不同品種為試驗(yàn)材料,從葉、葉柄、根、莖、原生質(zhì)體、合子胚、花藥、子房、花瓣、花萼、和花托成功地誘導(dǎo)了愈傷組織。

愈傷組織的成功誘導(dǎo)與品種的基因型有關(guān)?搖Lloyd等(1988)曾研究Roseprsica與xanthina,hybrida,Clarissa,Rcabrosa的愈傷發(fā)生能力,發(fā)現(xiàn)只有Rosepersica與xanthina在MS基本培養(yǎng)基上,添加低濃度的BAP和NAA時(shí),節(jié)間能產(chǎn)生愈傷,愈傷組織脆弱,呈淡黃綠色。Kunitake等(1993)研究了RoserugosaThunb,Rosemultiflora,Roseallbacv,SemiplenaRosehybridacv,DuplesRoseharisonii,Rosespinosissi的未成熟種子的愈傷發(fā)生能力,發(fā)現(xiàn)只有RoserugosaThurb能產(chǎn)生愈傷組織,品種Rontl和Soraya比品種Baccara和Mercedes更易產(chǎn)生愈傷(Kintzios等,1999)。

外植體類型?搖Aren等(1993)詳細(xì)地調(diào)查了RosehybridacvMeirutral不同外植體的愈傷誘導(dǎo)率,發(fā)現(xiàn)不同外植體愈傷產(chǎn)生的能力不同,葉為90%,根為70%,節(jié)間為55%,花藥為19%。

激素激素也是影響愈傷生成的重要因素,Rout等(1991)以Landora為材料,在添加BA和NAA,2,4-D的MS的培養(yǎng)基上,外植體在接種的7~12d后,在近軸面的葉柄和中脈處產(chǎn)生愈傷,愈傷組織誘導(dǎo)頻率高達(dá)92%。在接種后15~20d,外植體莖切端處產(chǎn)生愈傷,誘導(dǎo)率為76%。生長(zhǎng)素種類和濃度對(duì)愈傷產(chǎn)生能力的影響同樣很大。早期實(shí)驗(yàn)多采用NAA結(jié)合BAP或BA等,近年來多采用2,4—D,并證明2,4—D是誘導(dǎo)愈傷的必要因素(Kintzios等,1999;Rout等,1996;vanderSalm等,1996;Vises—suwan等,1997)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)2,4-D對(duì)愈傷的誘導(dǎo)效果依賴于月季的基因型,如2,4—D濃度從113umol/L增加到181umol/L降低了Rosehybrida栽培種“Care-freeBeauty”的愈傷誘導(dǎo)頻率,但該濃度則對(duì)另一個(gè)品種“GrandGala”無影響。對(duì)于“RedSunblaze”而言,當(dāng)濃度從113umol/L增加到452umol/L,則表現(xiàn)出愈傷的誘導(dǎo)率提高了,隨后當(dāng)2,4—D再增加,則顯著地降低愈傷的誘導(dǎo)頻率。愈傷組織在誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基上能得到很好繼代培養(yǎng)(subculture、Li等,2002)。VanderSalm等(1996)證明2,4—D對(duì)誘導(dǎo)Rosepersica與xanthina和Moneyway產(chǎn)生愈傷是非常必要的,進(jìn)一步添加低濃度的BA有正效應(yīng),但如BA濃度過高,則產(chǎn)生抑制作用。與以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果不同,Kintzios等(1999)則發(fā)現(xiàn)2,4—D對(duì)愈傷誘導(dǎo)有負(fù)影響作用,可能因?yàn)椴捎玫耐庵搀w是成熟的葉片。

合子胚的發(fā)育時(shí)期對(duì)愈傷的形成能力也有影響?搖如處于心形胚的合子胚,其愈傷誘導(dǎo)率只有2%,子葉胚時(shí)的合子胚愈傷誘導(dǎo)率達(dá)到85%。

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