珠美蘋果樹原產于日本北部的山區(qū),是三葉<0>和毛山荊子的天然雜交種,以野生狀態(tài)存在。因種子數(shù)量少,發(fā)芽困難,自然界數(shù)量很少。對其進行組織培養(yǎng)、快速繁殖是很有必要的。珠美<0>具有以下很突出的特征:
1.1珠美<0>的耐鹽堿能力特蹦強
通過海濱鹽堿地和內陸干旱地的栽培試驗證明,珠美<0>能在含鹽量為0.60%、pH=9.2的土壤中正常生長,是1個耐鹽力很強的樹種,它的耐鹽力僅次于圣柳,強于枸杞、紫穗槐和杜梨,比蘋果的其它砧木如平頂<0>、八棱<0>強得多。珠美<0>能在pH=3-9的范圍內生長,因此珠美<0>對綠化和改造鹽堿地有重要的意義。
1.2珠美<0>有很強的抗旱和抗病能力
1.3珠美<0>花色美觀
其花期長,花厚,樹體矮化,是美化和綠化城市的觀賞樹種。
1.4珠美<0>親和力強
珠美<0>與許多蘋果品種的親和力強,嫁接后<0>冠開張,枝條粗壯,節(jié)簡短,具有矮化效應。同時能使蘋果在鹽堿地栽培,擴大蘋果栽培范圍,是一種很有希望的蘋果新砧木。
1.5效益顯著
我國有1/4的耕地是鹽堿地,多數(shù)干旱和半干旱地區(qū)存在大片的鹽堿地、旱地和海灘,不能栽培蘋果,利用珠美<0>抗鹽堿的特性,不僅可以擴大蘋果的栽培范圍,而且可以綠化美化鹽堿灘和荒山,珠美<0>有重大的經濟效益、社會效益及生態(tài)效益。
2珠美<0>的組織培養(yǎng)與快速繁殖
2.1生產工藝流程
引進珠美<0>的野生種子——播種——選苗——莖尖培養(yǎng)——繼代增殖——誘導生根——營養(yǎng)缽移栽——苗圃移栽。
2.2珠美<0>組培快繁的技術要點
2.2.1外殖體與處理
無菌外殖體的來源有3種:
①從珠美<0>健壯無病毒的植株上采萌而未發(fā)的頂芽;
②采休眠枝條在室內水培發(fā)芽;
③從田間采開始萌發(fā)并帶有2~3片葉片的新梢。在超凈工作臺上將外植體用0.10%的升汞(加入2滴吐溫20)滅菌10min,再用無菌水反復沖洗6—10遍,在無菌條件下剝取莖尖進行接種培養(yǎng)。
2.2.2初代培養(yǎng)和繼代培養(yǎng)
接種在MS+6-BA0.50一Img/L+IAA0.50mg/L上的莖尖在25℃一28℃,相對濕度40%一60%,3 0001x光照,每天10—12h的培養(yǎng)條件下,1個月后,莖尖伸長和生長,此時將新長出的嫩芽剪下轉入新鮮培養(yǎng)基上,培養(yǎng)40d后產生1—4片葉的莖叢,此時剪下具有3-4片展葉,高約3—4cm的嫩莖轉入生根培養(yǎng)基誘導生根。把具有1—2片葉的嫩莖切下轉入繼代增殖培養(yǎng)基MS+6-BA 0.50ms/L+IAA0.50mg/L上繼續(xù)擴大繁殖,如此反復進行,可得到大批量的生根苗和無根苗。珠美<0>每45d的增殖系數(shù)能達到8.80倍。
2.2.3生根和移栽
轉入生根培養(yǎng)基上的珠美<0>嫩莖,經10。15d培養(yǎng)后一般都能生根,當根長0.50—1.50cm時,取出移栽,成活率較高。移栽時,將蛭石裝入育苗盤中,移栽后澆足水并用塑料薄膜保濕,在15—20℃的溫室內煉苗,使根系吸收能力和氣孔的調節(jié)功能得以恢復,2個月后小苗開始生長,產生新根、新葉,此時可移栽入田間苗圃。
春季氣溫較低時,要搭小拱棚保溫,夏季溫度高時,要用草簾或遮陽網遮蔭,并加強田間管理。9月以后移栽的小苗,當年若不出圃,待秋季落葉后,在苗基部培土防凍,次年再培育出圃。
3影響珠美<0>離體快繁的因素
3.1培養(yǎng)基
珠美<0>在鹽離子較高的培養(yǎng)基上生長較好,因此多用改良MS并附加一定濃度的細胞分裂素和生長素,就能不斷地增殖。生根培養(yǎng)基采用ASH培養(yǎng)基或MS培養(yǎng)基,并附加一定量的生長素。配置培養(yǎng)基時可選用質優(yōu)價低的瓊脂。增殖培養(yǎng)每升可加蔗糖或綿白糖30g,生根培養(yǎng)基糖濃度可減半。
3.2轉接時間
轉接時間和方法與珠美<0>在試管內的增殖或生根質量有很大的關系。初代培養(yǎng),當莖尖增殖時要及時轉到新鮮培養(yǎng)基上,以擴大繁殖。轉接剪切時一定要去掉老的愈傷組織,有利于促進產生更多的叢生芽;生根培養(yǎng)與轉接時間密切相關,苗齡過長,木質化程度高,生根率低;苗齡過短,木質化程度低,生根少而且根系短,移栽不易成活;Zui適苗齡應為40d左右。苗高3-4cm,有3~4片平展葉。
3.3繼代次數(shù)
繼代增值倍數(shù)與繼代次數(shù)有關,繼代培養(yǎng)代數(shù)過多,若超過100代轉接繁殖時,繁殖系數(shù)可高達11.80倍,但芽纖細、弱小、莖多,移栽不易成活,因此繼代培養(yǎng)代數(shù)不要超過60代為宜。
3.4培養(yǎng)條件
珠美<0>試管快繁質量與培養(yǎng)條件密切相關。恒溫培養(yǎng)不如變溫培養(yǎng)好;培養(yǎng)室密閉培養(yǎng)不如時時通風培養(yǎng)好;高溫培養(yǎng)不如適當?shù)蜏嘏囵B(yǎng)好;在生產過程中培養(yǎng)室的相對濕度在40%一60%為宜,當相對濕度超過80%時,試管苗易玻璃化且污染率高,濕度低于30%時。培養(yǎng)基易干,影響試管苗的生長;用透氣封口膜封口比用不透氣封口膜封口繁殖出的壯苗多。
4影響珠美<0>試管苗移栽的因素
4.1 自然光煉苗
由于培養(yǎng)室內光線較弱,試管苗的莖葉組織細嫩,移出試管后,光線變化劇烈,幼苗承受不了,易死亡,應逐步過渡。一種方法是移栽前20d,當根剛長出時,把試管苗帶瓶放在自然散射光下煉苗20d并在移栽前打開封口膜,夏季在自然散射光下放置1-3d,春季放置3-5d,再取出移栽,經自然光煉苗的珠美<0>試管苗移栽成活率明顯提高。
4.2移栽基質
基質是珠美<0>試管苗能否大批移栽成活的關鍵,經試驗能用于珠美<0>試管苗移栽的基質有蛭石、珍珠巖、火山灰、砂、腐殖土、腐熟的秸稈等,其中以蛭石和腐熟的秸稈為好。
4.3苗齡
移栽的試管苗,苗齡30-40d、具有3-4片展葉、葉色濃綠的苗移栽成活率高,苗齡過長,根已老化的珠美<0>試管苗移栽成活率低。
4.4移栽條件
移栽時的溫度、濕度、光照強度對移栽成活率有很大的影響。移栽后濕度應逐漸降低,長期保持高濕度易爛苗,劇烈降低濕度會使氣孔調節(jié)功能不健全的珠美<0>試管苗干枯死亡,Zui好采用間濕間干的方式逐漸降低濕度來刺激珠美<0>試管苗使其恢復健全孔調節(jié)功能:光線也應逐漸加強;溫度適當?shù)鸵恍┮?5℃-20℃為宜,過低不能生長,過高易爛苗。
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